核糖核酸酶A(Ribonuclease A,常用缩写RNase A),一种含4个二硫键的单链多肽,分子量约为13.7 kDa(氨基酸序列)。作为一种核糖核酸内切酶(endoribonuclease),特异性降解单链RNA上的胞嘧啶(C)或尿嘧啶(U)残基。具体来说,切割识别的是由某核苷酸上的5’-核糖和相邻的嘧啶类核苷酸3’-核糖上磷酸基团形成的磷酸二酯键,从而使得2’, 3’-环磷酸水解为对应的3’-核苷磷酸(比如,pG-pG-pC-pA-pG经RNase A切割产生pG-pG-pCp 和A-PG)。RNase A切割单链RNA活性最高,推荐工作浓度为1-100 μg/mL,兼容于各种反应体系。低盐浓度(0-100 mM NaCl),可用来切割单链RNA,双链RNA,以及RNA-DNA杂交形成的RNA链。然而,高盐浓度(≥ 0.3 M),RNase A仅特异性切割单链RNA。
产品性质
CAS号(CAS NO.) | 9001-99-4 |
外观(Appearance) | 白色冻干粉末 |
激活剂(Activator) | 钠盐、钾盐等 |
抑制剂(Inhibitor) | 核酸酶抑制剂 |
失活方法(Inactivation) | 加热不会失活,建议用离心柱或者酚氯仿抽提来充分去除 |
来源(Source) | 牛胰腺 |
溶解性(Solubility) | 溶于水(10 mg/mL) |
酶活力(Activity) | ≥ 60 Kunitz units/mg |
配置存储方法
此为RNase A储存液配制的常用方法之一,也可以根据实验室传统的方法,或者参考文献资料使用其他方法制备储存液(如直接溶于10 mM Tris-HCl, pH 7.5或者Tris-NaCl溶液)。在中性条件下煮沸RNase A溶液,会有RNase沉淀形成;在更低的pH下将其煮沸,如有沉淀可以观察到,可能由于蛋白杂质存在造成。煮沸之后若发现沉淀,可通过高速离心(13,000 rpm)去除杂质,然后分装冻存。 |
1)利用10 mM的醋酸钠(pH 5.2)制备10 mg/mL 的RNase A 储存液; |
2)100℃加热15 min; |
3)冷却到室温,加入1/10体积的1 M Tris-HCl(pH 7.4),调其pH至7.4(如:5 mL 10 mg/mL的RNase 储存液加入500 μL 1 M Tris-HCl, pH 7.4); |
4)分装于-20℃冻存,可稳定保存长达2年。 |
订购信息
产品名称 |
货号 | 规格 | 价格 |
RNA酶 |
G-05-0100 |
100mg | 询价 |
RNA酶 |
G-05-1000 |
1g | 询价 |
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